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液相色譜柱的平衡和再生是什么意思呢?

更新時間:2019-11-17      點擊次數(shù):3805
   液相色譜柱可以分為很多種:正相色譜柱,反相色譜柱,離子交換柱,液相色譜柱廠家眾多,不同的液相色譜柱也會有不同的型號。每個廠家有每個廠家的叫法。有的叫液相色譜柱,有的叫色譜柱,有的叫碳十八烷基硅烷化學(xué)建合柱。下面為大家介紹一下什么是液相色譜柱。
  液相色譜的柱子通常分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱,或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì),在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(ODS)稱為C18柱,其它常用的反相柱還有C8,C4,C2和苯基柱等。另外還有離子交換柱,GPC柱,聚合物填料柱等。本文重點介紹液相色譜柱的注意事項、維護、活化方法:
  液相色譜柱在使用前,進行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是*條件),只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。
  液相色譜柱的維護分為:色譜柱的平衡、色譜柱的再生、zui后才是色譜柱的維護。下面詳解:
  1.色譜柱的平衡
  反相色譜柱由工廠測試后是保存在乙腈/水中的。新柱應(yīng)先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請一定確保您分析樣品所使用的流動相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時間以流動相來平衡色譜柱,您就會在處理問題方面獲得zui大的"補償",而且您的色譜柱的壽命也會變得更長!操作步驟:
  a.平衡開始時將流速緩慢地提高,用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低,則需要較長的時間來平衡)
  b.如果使用的流動相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水"過渡"即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動相平衡;分析結(jié)束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護柱子。
  2.色譜柱的再生
  長期使用的色譜柱,往往柱效會下降(柱子的理論塔板數(shù)減低)。可以對色譜柱進行再生,在有條件的實驗室應(yīng)使用一個廉價的泵進行柱子的再生。
  選擇再生方法:
  極性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色譜填料)的再生:
  正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**
  非極性固定相(如反相色譜填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:水→乙腈→氯仿(或異丙醇)→乙腈→水。
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